Riistvara
Shimadzu Prominence – QTRAP 3200
Robustne ja mitmekülgne süsteem erinevate kromatograafiliste eraldamiste ning massspektromeetriliste skäneerimisvõimalustega (vt loetelu allpool). Kuigi QTRAP 3200 on vanem ning vähemtundlikum mudel kui QTRAP 4500, on tal foto- ja nanopihustus ionisatsiooniallikad lisaks tavapärastele Turbo V elektropihustusele. See võimaldab nii fotoionisatsiooni kui alla mikroliitristekoguste analüüsimist. Kromatograafia süsteemi saab täiendada fluorestsentsdetektoriga võimaldades samaaegselt massi spektrile tuvastada ka fluorestseeruvaid aineid.
Kromatograafia protokollid
Esiteks on võimalik otsene infusioon, ehk kromatograafi pumpasid ja süstimisseadet või spetsiifilist süstalt kasutatkse elundi ja proovi viimiseks mass-spektromeetrisse, kuid kromatograafia kolonni süsteemi ei ühendata ning ainete eraldamist seetõttu ei toimu. Et tegu on väga kiire analüüsiga – vaid kuni viis minutit proovi kohta – on see tihti eelistatud kui ökonoomseim meetod. Keeruliste segude, kõrge soola või muu kergeltioniseeruva aine juuresolekul või ka määratavate ainete väga madalatel kontsentratsioonidel võib aga otsene infusioon mitterahuldavaid tulemusi anda ning abi võib olla kromatograafilisest lahutamisest.
C18 analüütilised kolonnid on esmavalik juhtudel, kus ainete üksteisest lahutamine on vajalik. HILIC on teine sagedamini kasutust leidev kolonnitüüp. Analüüsiaeg tõuseb kolonniga 30-60 min peale ühe proovi kohta. Tuumiklabor eelistab kasutada omi kolonne, kui soovite kasutada isiklikku või mõnda väga spetsiifilist kolonni, siis palun kontakteeruge personaliga.
Mass spektromeetria skänneeringud
- Enhanced mass spectrum (EMS) – mass-spekter selle sõna tavapärases tähenduses, ehk m/z 50-1500 vahemiku intensiivsuste jaotus.
- Fragmentatsioonanalüüs – vajalik molekulide identifitseerimiseks ning eellasioonide ning MRM skänneeringute metoodikate ülesehitamiseks.
- Multiple reaction monitoring (MRM) – kasutab eelasiooni ning ühe fragmendi m/z väärtusi, et spetsiifiliselt vaadata vaid sellise kombinatsiooniga aineid proovis. Üks analüüs võib sisaldada paljusid ioonpaare võimaldades mitmete ainete samaaegset mõõtmist. Et keskendutakse vaid üksikutele ainetele on tegu spetsiifiliseima ja tundlikuima analüüsitüübiga, muutes ta soovitud variandiks kvantitatiivsetel analüüsidel.
- Eelasiooni skänneering – kasutades fragmendi m/z väärtust otsitakse kõiki aineid, mis antud fragmenti sisaldavad. Võib sobida biotransformatsiooni uuringuteks või ka sarnast struktuuri sisaldavate aineklasside (näiteks atsüülkarnitiinid) analüüsiks.
- Kõrgendatud resolutsioon (Enhanced resolution) – Kuigi QTRAPid on niinimetatud “madala resolutsiooniga” mass- spektromeetrid, võimaldab see skänneering näha kitsast piirkonda kõrgema lahutuvusega kui tavaline EMS skänneering. Kasulik, kui on tarvis täpsemalt hinnata isotoopide jaotust näiteks aine identiteedi määramisel.
Agilent 1200 - QTRAP 4500
Tundlikum kui QTRAP 3200 ning proovi sisestusel saab kasutada erinevaid 96-384 augulisi plaate. Samuti ühilduv kommertsiaalsete kittidega nagu BioCratese AbsoluteIDQ p180.
Kromatograafia protokollid
Esiteks on võimalik otsene infusioon, ehk kromatograafi pumpasid ja süstimisseadet või spetsiifilist süstalt kasutatkse elundi ja proovi viimiseks mass-spektromeetrisse, kuid kromatograafia kolonni süsteemi ei ühendata ning ainete eraldamist seetõttu ei toimu. Et tegu on väga kiire analüüsiga – vaid kuni viis minutit proovi kohta – on see tihti eelistatud kui ökonoomseim meetod. Keeruliste segude, kõrge soola või muu kergeltioniseeruva aine juuresolekul või ka määratavate ainete väga madalatel kontsentratsioonidel võib aga otsene infusioon mitterahuldavaid tulemusi anda ning abi võib olla kromatograafilisest lahutamisest.
C18 analüütilised kolonnid on esmavalik juhtudel, kus ainete üksteisest lahutamine on vajalik. HILIC on teine sagedamini kasutust leidev kolonnitüüp. Analüüsiaeg tõuseb kolonniga 30-60 min peale ühe proovi kohta. Tuumiklabor eelistab kasutada omi kolonne, kui soovite kasutada isiklikku või mõnda väga spetsiifilist kolonni, siis palun kontakteeruge personaliga.
Mass spektromeetria skänneeringud
- Enhanced mass spectrum (EMS) – mass-spekter selle sõna tavapärases tähenduses, ehk m/z 50-1500 vahemiku intensiivsuste jaotus.
- Fragmentatsioonanalüüs – vajalik molekulide identifitseerimiseks ning eellasioonide ning MRM skänneeringute metoodikate ülesehitamiseks.
- Multiple reaction monitoring (MRM) – kasutab eelasiooni ning ühe fragmendi m/z väärtusi, et spetsiifiliselt vaadata vaid sellise kombinatsiooniga aineid proovis. Üks analüüs võib sisaldada paljusid ioonpaare võimaldades mitmete ainete samaaegset mõõtmist. Et keskendutakse vaid üksikutele ainetele on tegu spetsiifiliseima ja tundlikuima analüüsitüübiga, muutes ta soovitud variandiks kvantitatiivsetel analüüsidel.
- Eelasiooni skänneering – kasutades fragmendi m/z väärtust otsitakse kõiki aineid, mis antud fragmenti sisaldavad. Võib sobida biotransformatsiooni uuringuteks või ka sarnast struktuuri sisaldavate aineklasside (näiteks atsüülkarnitiinid) analüüsiks.
- Kõrgendatud resolutsioon (Enhanced resolution) – Kuigi QTRAPid on niinimetatud “madala resolutsiooniga” mass- spektromeetrid, võimaldab see skänneering näha kitsast piirkonda kõrgema lahutuvusega kui tavaline EMS skänneering. Kasulik, kui on tarvis täpsemalt hinnata isotoopide jaotust näiteks aine identiteedi määramisel.